首页 > Industry News
新闻分类

我们做困难的事情:HPLC分析

浏览次数 : 35624
更新时间 : 2019-12-24 14:29:01

我们永远不会说科学很简单。实际上,其中的部分内容是如此复杂,以至于专家们甚至都对如何使用久经考验的科学手段回答一个迫切的问题感到困惑。聚合物的HPLC(高效液相色谱)通常就是这种情况。

HPLC是化学测试的一种非常有用的方法,科学家经常使用HPLC来分离混合物中的成分,识别成分,并确定溶液中每种成分的含量。该测试涉及通过装有固体吸附材料的色谱柱将包含样品液的加压液体溶剂泵送通过。样品溶液中每种组分的原子,离子或分子将与吸附剂发生不同的相互作用,最终导致组分从色谱柱流出时分离。一旦分离,我们就可以识别和测量组件。

很漂亮吧?除了HPLC对小分子的效果最好,而且众所周知,您的典型聚合物分子绝非小分子。

聚合物(蛋白质除外)的HPLC分析很少见,而且非常具有挑战性,”我们色谱实验室经理兼专家Jason Todd说。与小分子相比,可以溶解聚合物的溶剂的选择通常非常有限,并且限制了您可以使用的HPLC方法的类型。同样,聚合物包含链长分布,这通常会在HPLC分离过程中导致多个峰或非常宽的峰。我们需要一个相当窄的峰来量化每种聚合物的含量。为了找到合适的HPLC色谱柱和流动相溶剂,每种聚合物要实现一个狭窄的峰需要大量的方法开发。”

最近,Polymer Solutions从事的工作阻碍了另外两个实验室。客户要求PSI量化包含聚合物的水基清洁剂中存在的防腐剂化合物(对羟基苯甲酸酯)。在最初的测试中,该聚合物的性能不符合预期,并且某些防腐剂化合物的水溶性不高,因此它们在HPLC测试中反应不佳。

在讨论了客户的性能要求以及其他实验室以前尝试过的测试之后,PSI的团队收集了有关测试样品的组成和聚合物特性(包括分子量,化学组成和溶解度)的信息。文献综述提供了一种聚合物的有用测试信息,而另一种则没有。

“在我们开始方法开发时,我很幸运地参加了有关聚合物分析的技术会议,通过参加演示并与聚合物HPLC分离领域的领先专家交谈,我获得了宝贵的见解,杰森说。

我们的团队使用正交HPLC方法进行初步筛选实验。基于其分离目标聚合物的初步性能,我们选择了一种HPLC方法进行进一步开发。我们完善了方法参数,直到可以从测试中获得最佳结果。我们还开发了一种用于样品和标准品制备的方法,并进行了准确性和精密度研究,以验证我们开发的方法是否适合其预期用途。

“这个例子是我们方法开发过程的典型代表,” Jason说。 “我们首先要确定客户的目标(量化水性清洁剂配方中存在的防腐剂化合物)以及任何已知的限制因素(例如可用样品量)和潜在问题(存在聚合物,这可能会干扰分析)。然后,根据目标物的物理性质(挥发性,紫外线吸收率)和预期浓度范围,选择合适的分析方法(HPLC,GC等)。我们利用聚合物溶解度的知识来确定合适的溶剂和萃取技术。然后,我们将使用我们的知识和经验来进行方法开发,以解决过程中遇到的任何问题。

“我们的目标是最终找到一种适合其预期用途的方法,以能够以可接受的精度和精确度测量目标化合物的浓度。”